EnVision法又稱為ELPS法，抗原—抗體反應(yīng)結(jié)合后，第二抗體上標(biāo)記有多聚化合物(葡聚糖)酶復(fù)合物(EnVision復(fù)合物)，與第一抗體結(jié)合，進(jìn)而由酶作用底物進(jìn)行顯色定位。EnVision復(fù)合物是利用一種多聚化合物將HRP或AKP和第二抗體(抗鼠或抗兔IgG)同時(shí)標(biāo)記在一個(gè)多聚化合物上，即形成酶—多聚化合物—第二抗體巨大復(fù)合物。每1個(gè)分子的復(fù)合物中約含?o個(gè)分子的HRP和10個(gè)分子的第二抗體，復(fù)合物中的HRP的絕對(duì)數(shù)量遠(yuǎn)高于其他復(fù)合物(如ABC)，本身已具備高度放大作用，因此EnVision法敏感性顯著高于其他方法。復(fù)合物中存在多個(gè)第二抗體，也增加了該復(fù)合物與特異性抗體的結(jié)合機(jī)會(huì)。同時(shí)，人體內(nèi)不存在該多聚化合物，無非特異性干擾，故背景染色淺。此外，染色步驟為兩步，且第二抗體孵育時(shí)較短，使該方法更省時(shí)而簡便。

EnVision法的操作流程是什么？

(1)4弘m常規(guī)石蠟切片經(jīng)烤片后，常規(guī)二甲苯、乙醇脫蠟至水，PBS洗3minX3次。

(2)預(yù)處理組織切片(可用酶消化或AR或不作任何處理，依一抗質(zhì)量而定)。

(3)PBS洗3rainX3次。

(4)0．3%H202阻斷內(nèi)源性過氧化物酶15rain，PBS洗3rainX 3次。

(5)適當(dāng)稀釋特異性一抗，37~C孵育幾，PBS洗3minX3次。

(6)EnVision復(fù)合物(即用型)孵育30min，PBS洗3minx3次。

(7)水洗，復(fù)染，常規(guī)樹膠封片。

(8)結(jié)果觀察。